在全球女性惡性腫瘤中，乳腺癌發病率常年居首，而遠處轉移更是導致患者高死亡率的 “元兇"。盡管免疫治療革新了腫瘤治療格局，但乳腺癌固有的 “低免疫原性" 特征，使得細胞毒性 T 淋巴細胞（CTLs）難以浸潤腫瘤，免疫響應微弱。如何喚醒腫瘤微環境的 “免疫活性"，成為轉移性乳腺癌治療的關鍵難題。

近期，發表于《Materials Today》的一項研究，提出了一種 “化療藥介導凋亡-焦亡轉換" 的創新策略，通過構建智能納米平臺同步激活適應性與先天性免疫，為轉移性乳腺癌免疫治療提供了新方向。更值得關注的是，該研究中關鍵的蛋白表達驗證實驗，離不開 Absin 核心產品的技術支撐。

一、核心研究思路：瞄準 “雙瓶頸"，構建 “智能開關"

研究團隊首先明確了乳腺癌免疫治療的兩大核心瓶頸：

1. 焦亡執行蛋白不足：焦亡（一種強免疫原性細胞死亡）需 Gasdermin E（GSDME）介導，但乳腺癌細胞中 GSDME 編碼基因 DFNA5 因甲基化沉默，導致化療藥難以誘導焦亡；

2. 腫瘤 DNA 釋放不足：傳統 DNA 損傷化療藥無法高效釋放腫瘤來源 DNA，且 DNA 酶（DNase）易降解 DNA，難以激活 cGAS-STING 先天性免疫通路。

針對這兩個問題，研究團隊設計了 “三步走" 解決方案：

1. 藥物組合優化：選擇去甲基化藥物地西他濱（DEC）上調 GSDME 表達，DNA 損傷藥物7 - 乙基 - 10 - 羥基喜樹堿（SN38）激活 caspase-3（介導凋亡）與 cGAS-STING 通路；

2. 智能納米載體構建：打造谷胱甘肽（GSH）響應型納米平臺（命名為PL@SD），表面修飾 PD-L1 阻斷肽（PD-L1 pep），實現腫瘤靶向遞送；

3. 雙機制協同激活：PL@SD 在腫瘤內釋放 DEC/SN38，一方面通過 “caspase-3 切割 GSDME" 實現凋亡向焦亡轉換（釋放免疫刺激信號），另一方面通過焦亡孔道促進腫瘤 DNA 釋放，激活 cGAS-STING 通路，最終同步喚醒適應性與先天性免疫。

二、關鍵研究成果：從體外機制到體內療效的全面突破

1. 體外驗證：DEC+SN38 實現 “凋亡-焦亡轉換"，激活 cGAS-STING

• GSDME 上調成功：TCGA 數據庫顯示，乳腺癌患者 DFNA5（GSDME 編碼基因）表達顯著低于正常組織（圖 2A）；DEC 處理后，4T1 乳腺癌細胞 GSDME 蛋白表達隨濃度升高而顯著增加（圖 2B-C）。

• 凋亡向焦亡轉換：單獨使用 SN38/DOX/ 順鉑僅誘導 4T1 細胞凋亡（細胞皺縮、凋亡小體，圖 2D 白色箭頭）；而 DEC 預處理后，細胞出現典型焦亡形態（細胞腫脹、氣泡樣突起，圖 2D 紅色箭頭）。

• cGAS-STING 通路激活：SN38 處理 4T1 細胞后，其條件培養基能顯著上調 DC2.4 細胞中 p-STING、p-IRF3 的表達（圖 2E-F），證明腫瘤 DNA 釋放可有效激活樹突狀細胞（DCs）的先天性免疫通路。

2. PL@SD 納米載體：靶向性與響應性雙優

• 理化性質優異：PL@SD 呈球形， hydrodynamic 直徑約 96 nm（利于 EPR 效應富集），zeta 電位為 4.95 mV（PD-L1 pep 修飾所致），在 PBS 和 10% FBS 中 30 天內穩定性良好（圖 3A-B）；

• GSH 響應釋放：腫瘤微環境高 GSH 可觸發 PL@SD 解體（直徑增至 564 nm，圖 3C），120 h 內 SN38/DEC 釋放率分別達 64.81%/89.33%，避免正常組織損傷（圖 3D）；

• PD-L1 靶向與阻斷：PL@SD 對高表達 PD-L1 的 4T1 細胞攝取量是低表達 PD-L1 的 3T3 細胞的 1.49 倍（圖 3E-F），且能顯著下調 4T1 細胞 PD-L1 表達，逆轉化療誘導的 PD-L1 上調（圖 3G-H）。

3. 體內療效：顯著抑制原發腫瘤與肺轉移，建立免疫記憶

• 原發腫瘤抑制：在 4T1 乳腺癌模型中，PL@SD 組腫瘤抑制率達 67.64%，顯著高于 PL@S（37.73%）和 L@SD（55.97%）組；H&E 染色顯示 PL@SD 組腫瘤壞死最嚴重，Ki67 陽性細胞比例僅 13.32%（圖 4A-C）；

• 肺轉移阻斷：對照組小鼠肺部可見大量轉移結節，而 PL@SD 組肺轉移結節減少 83.07%（圖 4D-E）；

• 免疫記憶建立：腫瘤切除后再接種 4T1 細胞，PL@SD 組小鼠腫瘤生長速率較對照組降低 2.46 倍，且淋巴結中 CD8 + 效應記憶 T 細胞（CD8+ TEM）比例顯著升高，證明長期免疫記憶形成（圖 4F-G）。

三、Absin 產品助力：Western blot 實驗的 “信號檢測核心"

在這項研究中，蛋白表達驗證是證明機制的關鍵 —— 無論是 GSDME 的上調、caspase-3 的激活，還是 STING 通路蛋白（STING、p-STING、IRF3、p-IRF3）的檢測，都依賴 Western blot 技術。而 Western blot 的信號輸出，離不開高效特異的二抗。

研究團隊選用的 Goat anti-rabbit IgG-HRP 抗體（Absin 貨號：abs20040），正是實現蛋白信號可視化的核心工具：

1. 產品信息

• 靶點：兔源 IgG

• 標記物：辣根過氧化物酶（HRP）

• 應用場景：Western blot、ELISA 等（本研究用于 Western blot）

2. 在文中的關鍵作用

HRP 標記二抗的核心功能是 “連接一抗與化學發光信號"：

1. 特異性結合一抗：abs20040 可特異性識別兔源一抗（如抗 GSDME 抗體、抗 caspase-3 抗體、抗 STING 抗體等），確保信號的特異性；

2. 催化化學發光：HRP 可催化底物（如 ECL）產生發光信號，使蛋白條帶顯影，從而實現蛋白表達的定性與定量分析。

在研究的多個關鍵實驗中，abs20040 均發揮了不可替代的作用：

• 驗證 DEC 對 GSDME 的上調；

• 檢測 caspase-3 切割 GSDME 產生的 GSDME-N 片段；

• 分析 DC2.4 細胞中 STING 通路蛋白的磷酸化水平。

這些實驗數據直接支撐了 “DEC 上調 GSDME"“PL@SD 誘導凋亡-焦亡轉換"“cGAS-STING 激活" 等核心結論，是研究機制成立的重要證據。

四、總結：科學價值與 Absin 的科研支持

這項研究的創新之處在于，將 “表觀遺傳調控"“細胞死亡類型轉換"“納米靶向遞送" 三者結合，為現有化療藥的免疫治療應用開辟了新路徑 —— 無需開發新藥物，僅通過優化組合與遞送方式，即可顯著提升轉移性乳腺癌的免疫療效。

而 Absin 作為科研試劑供應商，始終致力于為研究者提供可靠的實驗工具。本次研究中使用的 abs20040 羊抗兔 IgG-HRP 二抗，憑借其高特異性、高靈敏度的特點，助力研究者精準捕獲蛋白表達信號，為機制驗證提供了穩定的數據支撐。未來，Absin 將繼續以優質產品賦能更多腫瘤免疫、納米醫學領域的突破性研究，加速科研成果向臨床轉化。

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