在全qiu感染性疾病防控領域,黏膜免疫因其能在病原體入侵的di一道防線建立保護屏障,成為疫苗研發的核心方向之一。近期,一項發表于《ACS Nano》的研究(doi:10.1021/acsnano.4c14690)成功開發出抗原錨定型酵母口服疫苗,為黏膜疫苗的臨床轉化提供了全新方案。值得關注的是,Absin 的重組 SARS-CoV-2 RBD 蛋白在該研究中作為關鍵實驗材料,為疫苗的免疫原性驗證等核心環節提供了重要支持。
文獻標題:Orally Antigen-Engineered Yeast Vaccine Elicits Robust Intestinal Mucosal Immunity
發表期刊:ACS Nano(IF 16)
DOI:https:/ /doi.org/10.1021/acsnano.4c14690
使用Absin試劑:Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD Protein(abs05113)

黏膜是人體抵御病原體入侵的di一道防線,腸道黏膜更是與外界微生物接觸的重要界面。但傳統黏膜疫苗面臨抗原展示效率低、佐劑安全性不足兩大難題,難以同時激活先天和適應性黏膜免疫。
基于此,研究團隊將目光投向酵母表達系統:一方面,酵母自身的 β- 葡聚糖可作為天然安全佐劑;另一方面,真核酵母能實現抗原的糖基化修飾,更接近天然病毒抗原的結構。團隊創新性地設計了 “抗原錨定" 和 “抗原分泌" 兩種酵母疫苗模式,以 SARS-CoV-2 的 RBD 為模型抗原,探索最you的黏膜免疫激活策略。
研究整體遵循 “疫苗設計 - 體外驗證 - 體內分布 - 免疫效應 - 機制解析 - 競品對比" 的完整邏輯鏈,層層遞進驗證抗原錨定型酵母疫苗的優勢:
疫苗構建:以畢赤酵母為載體,分別構建膜錨定型(YVm)和分泌型(YVs) RBD 酵母疫苗。YVm 通過 GPI 錨定將 RBD 展示于酵母表面,YVs 則通過信號肽實現 RBD 分泌。

體外特性驗證:檢測疫苗的 RBD 表達、糖基化修飾、胃腸道穩定性及樹突狀細胞(DC)激活能力。
體內分布追蹤:通過 DiD 標記追蹤疫苗在小鼠腸道、派氏結(PP)及腸系膜淋巴結(MLN)的定植與細胞攝取情況。
免疫效應評估:檢測疫苗誘導的 RBD 特異性 IgA/IgG 抗體水平及假病毒中和能力。
機制解析:通過單細胞測序和轉錄組分析,闡明疫苗激活 DC-Tfh-B 細胞互作的免疫機制。
競品對比:將酵母疫苗與細菌錨定疫苗(BVm)、細胞膜仿生納米疫苗(CNV)對比,驗證其免疫優勢。
經免疫印跡驗證,YVm 的 RBD 實現膜錨定表達且存在糖基化修飾(分子量約 60kDa,去糖基化后為 35kDa),而 YVs 為分泌型表達(對應原文圖 2B、2C);

YVm 的 RBD 可與 ACE2 高效結合,且在模擬胃腸液中穩定性優異,能有效激活骨髓來源樹突狀細胞(BMDC)成熟(對應原文圖 2D-2F);

口服后 YVm 可在小鼠小腸定植 6-12h,6h 時在派氏結、12h 時在腸系膜淋巴結達到熒光信號峰值,且能被 M 細胞、B 細胞及 DC 高效攝取(對應原文圖 3A-I)。

免疫小鼠腸道黏膜的 RBD 特異性 sIgA 滴度達 103 量級,血清 IgG 水平較 YVs 組高 30%-40%(對應原文圖 5A、5B);

腸道灌洗液中的 IgA 對 SARS-CoV-2 假病毒的中和率超 60%,血清 IgG 也展現出強中和活性,顯著優于 YVs 組(對應原文圖 5D、5E);

轉錄組及單細胞測序顯示,YVm 可顯著促進派氏結和腸系膜淋巴結中 DC 成熟、Tfh 細胞分化及生發中心 B 細胞激活,上調 CCR7、CXCR5 等趨化因子表達,強化 T-B 細胞互作(對應原文圖 4、圖 6)。


對比 BVm 和 CNV,YVm 誘導的 RBD 特異性 IgA/IgG 水平及假病毒中和能力均居首wei,且無明顯毒性(對應原文圖 7)。

在整個研究中,Absin 重組 SARS-CoV-2 RBD 蛋白(貨號 abs05113) 承擔了核心的實驗參照與驗證功能,具體作用如下:
作為免疫印跡陽性對照:在驗證 YVm 和 YVs 的 RBD 表達實驗中,研究團隊使用 50ng Absin RBD 蛋白作為陽性對照,精準判定酵母疫苗中 RBD 的表達效率及分子量(對應原文圖 2B)。

校準抗原活性檢測體系:在驗證 RBD 與 ACE2 的結合活性、模擬胃腸液中 RBD 穩定性等實驗中,Absin RBD 蛋白作為標準品,確保了實驗數據的準確性和可比性。
Absin 重組 RBD 蛋白憑借高純度、高活性的產品特性,為研究中疫苗抗原的表達驗證和活性評估提供了可靠的原料保障,助力科研團隊高效完成核心實驗環節。
該研究首ci闡明了抗原展示模式對酵母黏膜疫苗免疫效果的影響,證實膜錨定型酵母疫苗可通過整合 “天然佐劑 + 糖基化抗原" 實現強效黏膜免疫。而 Absin 產品在研究中的關鍵應用,也體現了高品質生物試劑對前沿疫苗研發的重要支撐價值。
本文內容基于《ACS Nano》(DOI: 10.1021/acsnano.4c14690)原文獻;文中涉及的原文獻圖片、數據等知識產權歸原期刊及研究團隊所有。若存在侵權情形,敬請及時聯系我方刪除,我方將積極配合處理。
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