在組織再生領域，巨噬細胞的極化狀態直接決定修復結局 —— 促炎 M1 表型加劇組織損傷，而促再生 M2 表型則為修復創造理想微環境。如何高效、精準地誘導巨噬細胞從 M1 向 M2 極化，一直是臨床轉化中的核心難題。近期發表于《Advanced Materials》的一項重磅研究，創新性地構建了 siAkt2 負載納米遞送系統，成功實現巨噬細胞代謝重編程與極化調控，為牙周炎等炎癥相關骨缺損修復提供了全新策略。Absin 作為關鍵試劑供應商，其優質產品為該研究的順利開展提供了堅實支撐。

一、研究思路：精準靶向 + 高效遞送，破解巨噬細胞調控難題

核心痛點

siRNA 介導的基因沉默是調控細胞功能的*工具，但巨噬細胞內豐富的核酸酶會快速降解 siRNA，且傳統載體裝載量有限，難以達到有效沉默閾值；同時，Akt2 激酶作為糖酵解關鍵調控因子，其過度激活會驅動巨噬細胞 M1 極化，加劇炎癥與骨吸收。

解決方案

研究團隊設計了 “多重復序列裝載 + 膽固醇修飾壓縮 + PLLA 封裝" 的三重遞送策略：

• 1. 通過滾環轉錄（RCT）技術構建含大量重復 siAkt2 序列的 RNA 微球，實現 siRNA 的高密度裝載；

• 2. 經膽固醇修飾 DNA（DNA-Chol）壓縮為納米級 RNA 復合物（siAkt2 RNPs），提升細胞內化效率；

• 3. 采用生物相容性優良的 PLLA 封裝形成 siAkt2 RNP@PLLA NPs，增強體液穩定性與溶酶體逃逸能力，最終實現 siAkt2 的持續胞內釋放，沉默 Akt2 基因并誘導巨噬細胞 M2 極化（圖 1，對應原文 Scheme 1）。

圖 1 原文 Scheme 1：納米遞送系統的構建流程、胞內作用路徑及骨再生機制

二、核心研究成果：從體外機制到體內修復的全鏈條驗證

1. 納米載體性能zhuo越，穩定性與遞送效率雙優

結構與穩定性：

siAkt2 RNP@PLLA NPs 呈清晰核殼結構，平均粒徑 293.16±33.18 nm，在體液環境中 120 h 仍保持 75.85% 的完整性，且能耐受溶酶體酸性環境（圖 2，對應原文 Figure 1c-e）；

圖 2 原文 Figure 1：a) siAkt2 微球與 RNPs 的形態；c) TEM 下 NPs 核殼結構；d) 體液中穩定性；e) 酸性環境下形態變化

胞內遞送：

PLLA 外殼顯著促進巨噬細胞內吞，24 h 即可實現高效溶酶體逃逸，持續釋放 siAkt2，轉染效率遠超傳統脂質體載體（圖 3，對應原文 Figure 2a-b）。

圖 3 原文 Figure 2：a) 不同時間點細胞內吞效率；b) 12 h（溶酶體共定位）與 24 h（溶酶體逃逸）的熒光成像

2. 精準調控巨噬細胞功能，實現代謝重編程與 M2 極化

基因沉默效率：

qPCR 與 Western blot 證實，該系統可將 Akt2 基因表達抑制至 40-50%，且沉默效果持續 7 天以上（圖 4，對應原文 Figure 3a-b）；

表型轉換：

顯著提升 M2 標志物 CD206 的陽性率（圖 4c，對應原文 Figure 3c），下調 IL-1β、TNF-α 等促炎因子，上調 IL-4、IL-10 等抗炎因子（圖 4d-e，對應原文 Figure 3d-e）；

代謝重編程：

抑制無氧糖酵解，增強氧化磷酸化（OXPHOS），降低 ROS 生成，修復線粒體功能（圖 5，對應原文 Figure 4）。

圖 4 原文 Figure 3：a) Akt2 基因沉默效率；b) AKT2 蛋白表達變化；c) F4/80+CD206+ M2 細胞比例；d-e) 炎癥因子表達調控

圖 5 原文 Figure 4：a) 胞外酸化率（糖酵解）與耗氧率（OXPHOS）；f) ROS 生成抑制；h) 線粒體膜電位修復；i) 代謝重編程機制示意圖

3. 體內骨修復效果xian著，臨床轉化潛力巨大

在小鼠牙周炎骨缺損模型中，局部注射 siAkt2 RNP@PLLA NPs 后：

骨再生能力：

4 周后牙槽骨體積分數（BV/TV）顯著提升，骨缺損高度恢復至正常水平的 2/3 以上（圖 6，對應原文 Figure 5d-e）；

圖 6 原文 Figure 5：d) 微 CT 3D 重建與骨體積分析；e) HE 染色顯示骨組織再生與牙周膜形成

免疫微環境改善：

顯著減少 CD68+iNOS+ M1 巨噬細胞，增加 CD68+CD163+ M2 巨噬細胞，營造促修復微環境（圖 7，對應原文 Figure 6b）。

圖 7 原文 Figure 6b：免疫熒光染色顯示 M1（CD68+iNOS+）與 M2（CD68+CD163+）巨噬細胞比例變化

三、Absin 產品助力：關鍵試劑賦能研究核心環節

該研究的核心機制驗證與表型分析中，Absin 的 iNOS 抗體發揮了不ke或缺的作用：

產品信息

核心作用

作為 M1 巨噬細胞的特異性標志物，iNOS 的表達水平直接反映促炎巨噬細胞的比例。研究中通過 Absin 的 iNOS 抗體與 CD68 抗體（巨噬細胞通用標志物）進行雙重免疫熒光染色，精準量化了不同實驗組中 M1 巨噬細胞的數量變化：

• 1. 清晰區分 M1（CD68+iNOS+）與 M2（CD68+CD163+）巨噬細胞群體，直觀呈現 siAkt2 RNP@PLLA NPs 對巨噬細胞極化的調控效果；

• 2. 為 “納米遞送系統通過沉默 Akt2 誘導 M2 極化" 的核心結論提供了直接的形態學證據；

• 3. 抗體的高特異性與熒光穩定性確保了體內組織染色結果的可靠性，為后續骨再生機制分析奠定基礎。

四、總結與展望

該研究通過創新性的納米遞送系統設計，成功突破了巨噬細胞 siRNA 遞送效率低、作用時間短的技術瓶頸，為炎癥相關組織修復提供了 “基因沉默 - 代謝重編程 - 免疫調控" 的一體化解決方案。Absin 的 iNOS 抗體憑借優異的特異性與適用性，成為巨噬細胞表型分析的關鍵工具，助力研究團隊精準驗證了核心機制。

未來，隨著納米遞送技術與靶向治療策略的深度融合，Absin 將持續提供高品質的免疫檢測、分子生物學等系列試劑，為組織再生、腫瘤免疫、炎癥調控等領域的科研創新賦能，與全球科研工作者共同推動臨床轉化研究的突破與發展！